背景：

       胰高血糖素樣肽-1受體（Glucagon-like peptide-1 receptor, GLP-1R）是胰島β細(xì)胞表面表達(dá)的一種G蛋白偶聯(lián)受體。激活的GLP-1R通過(guò)對(duì)腺苷酸環(huán)化酶通路的刺激，觸發(fā)cAMP的生成，通過(guò)cAMP反應(yīng)元件（cAMP response element, CRE）激活下游基因表達(dá)，從而促進(jìn)胰島素的合成及釋放（圖1）。GLP-1R是^[1]。

圖1. GLP-1R信號(hào)通路^[2]

       Rhinogen^? GLP-1R Reporter Bioassay是一種生物發(fā)光報(bào)告基因檢測(cè)方法，其作用機(jī)理（圖2）基于GLP-1R反應(yīng)的主要信號(hào)通路cAMP/PKA信號(hào)途徑，可用于糖尿病治療性藥物的高通量篩選。本系統(tǒng)采用工程改造的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（Chinese hamster ovary cells，CHO cells）作為測(cè)活細(xì)胞，該細(xì)胞株穩(wěn)定表達(dá)GLP-1R以及由CRE反應(yīng)元件驅(qū)動(dòng)表達(dá)的螢火蟲熒光素酶。在該細(xì)胞中，GLP-1R的激活觸發(fā)cAMP的產(chǎn)生，cAMP則激活熒光素酶基因的表達(dá)，而熒光素酶的活性通過(guò)生物發(fā)光進(jìn)行定量。

圖2. Rhinogen^? GLP-1R Reporter Bioassay原理圖

產(chǎn)品規(guī)格：

特點(diǎn)：

       Rhinogen^? GLP-1R報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)提供的GLP-1R藥物生物學(xué)活性檢測(cè)方法操作具有操作簡(jiǎn)便（圖3）、變異性低、靈敏度高等特點(diǎn)。

       1. 原理明確：基于GLP-1R反應(yīng)的主要信號(hào)通路cAMP/PKA信號(hào)途徑；

       2. 通 量 高：可在96孔、384孔培養(yǎng)板中進(jìn)行GLP-1R激動(dòng)劑或者拮抗劑的高通量篩選、GLP-1類似物篩選、藥物高通量檢測(cè)；

       3. 快速易用：檢測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)單（圖3），檢測(cè)試劑易用；

       4. 信噪比高：信號(hào)/背景的比率高。

       Rhinogen^? GLP-1R報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)的各項(xiàng)特性使得其可作為針對(duì)GLP-1R藥物篩選及檢測(cè)的有效手段。同時(shí)，該法可作為針對(duì)GLP-1R藥物的生物學(xué)活性常規(guī)檢測(cè)方法及批簽發(fā)檢測(cè)指標(biāo)。

圖3. Rhinogen^? GLP-1R Reporter Bioassay檢測(cè)流程圖

運(yùn)輸及存儲(chǔ)：

       運(yùn)輸方式：干冰運(yùn)輸

       儲(chǔ)       存：收到細(xì)胞后，請(qǐng)立即將GLP-1R報(bào)告基因測(cè)活細(xì)胞凍存管轉(zhuǎn)移至-140°C以下的保存條件長(zhǎng)期保存。 

參考文獻(xiàn)：

       [1] 于雷，范文紅，王蘭，周長(zhǎng)明，王軍志，饒春明. 報(bào)告基因法檢測(cè)促胰島素分泌肽融合蛋白生物學(xué)活性. 藥物分析雜志Chin J Pharm Anal2016, 36(3): 426-431

       [2] Ramya S. Kuna et al., Glucagon-like peptide-1 receptor-mediated endosomal cAMP generation promotes glucose-stimulated insulin secretion in pancreatic β-cells. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2013, 305: E161-E170.