背景：

       Rhinogen^? IdeS protease是利用E. coli表達系統(tǒng)重組表達生產(chǎn)并經(jīng)過分子改造得到的重組IdeS蛋白酶，分子量大小約為36kDa。其僅在鉸鏈區(qū)下方的一個特定位點裂解IgG以產(chǎn)生F(ab')2和Fc片段。且在生理條件下切割I(lǐng)gG，從而保持免疫原性。在pH 6.0~8.0范圍的常用緩沖液中，IdeS蛋白酶可有效切割多種抗體。經(jīng)過改造后的IdeS蛋白酶具有更高的酶活和更廣的底物特異性，除可酶切人IgG1~4（切割位點如下表1）、猴、羊、兔IgG外，還對小鼠IgG2a、IgG3具有特異性切割活性。

       Rhinogen^? Immobilized IdeS，Microspin是一種將Rhinogen^? IdeS protease共價偶聯(lián)到瓊脂糖珠的樹脂，可在特定位點裂解IgG以產(chǎn)生F(ab')2和Fc片段。消化完成后的溶液內(nèi)，可得到F(ab')2和Fc片段，而不含IdeS酶。

包裝規(guī)格：

       Rhinogen^? Immobilized IdeS，Microspin包裝規(guī)格如下：

       一支Immobilized IdeS，Microspin可用于消化0.5mg IgG。
       產(chǎn)品儲存于20%乙醇中，不添加防腐劑。

儲存條件：

       采用冰袋運輸，Immobilized IdeS，Microspin產(chǎn)品儲存于20％乙醇中，收到產(chǎn)品后請立即將其置于2-8℃保存。避免凍存！

產(chǎn)品特點：

       Rhinogen^? Immobilized IdeS，Microspin具有如下特性：

       1. 使用方便：消化完成后，通過離心即可分離得到消化產(chǎn)物；

       2. 回收率高：F(ab')2回收率＞85%以上；

       3. 穩(wěn)定性高：每批產(chǎn)品都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制，以實現(xiàn)產(chǎn)品批間穩(wěn)定性。 

應用：

       重組抗體藥物的結(jié)構(gòu)表征分析。

操作說明：

       1. Rhinogen^? Immobolized IdeS，Microspin能有效地用于酶切人類、人源化、嵌合、羊、兔和猴的IgG，并對小鼠IgG2a和IgG3也具有中等活性。同時也適用于許多Fc-融合蛋白以及抗體藥物綴合物（antibody drug conjugates，ADCs）的酶切；不適用于小鼠IgG1/IgG2b、大鼠、豬、?；蛏窖騃gG。此外，它不能切割非IgG同種型，包括IgA、IgM、IgD和IgE；
       2. 對于小鼠IgG2a和小鼠IgG3的切割，建議適度提高孵育溫度（酶切溫度越接近37℃，則酶活越高）及孵育時間（2小時至過夜）；
       3. 理想的IgG濃度應在0.5-20mg/ml的范圍內(nèi)；
       4. 通過SDS-PAGE很容易確定IgG的切割；
       5. 將消化產(chǎn)物與protein A磁珠孵育30~60分鐘后，可以獲得純化的F(ab’)2片段；另瑞安生物可提供產(chǎn)品 Rhinogen^? Immobolized IdeS Cut-Pure Kit，Microspin（貨號：QIP-102），內(nèi)包含Immobilized IdeS，Microspin及Protein A純化柱；
       6. 最適的酶切反應緩沖液pH為6.0~8.0，在低于pH5.0體系中，IdeS 固定化酶會不可逆的失活，在高于pH8.0體系中需要適當延長/優(yōu)化反應條件；
       7. 本產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人或動物的診斷及治療用途。