背景:
IdeS是僅在鉸鏈區(qū)下方的一個(gè)特定位點(diǎn)裂解IgG以產(chǎn)生F(ab')2和Fc片段的免疫球蛋白降解酶。Rhinogen? IdeS protease是利用E.coli系統(tǒng)重組表達(dá)生產(chǎn),并經(jīng)過(guò)分子改造得到的重組IdeS蛋白。其含有His標(biāo)簽,在酶切完成后很容易從酶切反應(yīng)體系中分離去除。IdeS蛋白酶在生理?xiàng)l件下切割I(lǐng)gG,從而保持免疫反應(yīng)性。在pH 6.0~8.0范圍的常用緩沖液中,IdeS蛋白酶可有效切割多種抗體。經(jīng)過(guò)改造后的IdeS蛋白酶具有更高的酶活和更廣的底物特異性,除可酶切人IgG1~4、猴、羊、兔IgG外,還對(duì)小鼠IgG2a、IgG3具有特異性切割活性。
包裝規(guī)格:
Rhinogen? IdeS protease包裝規(guī)格如下:
目錄號(hào) |
規(guī)格 |
QIP-001-A |
5000U |
QIP-001-B |
5×5000U |
QIP-001-C |
1000U |
產(chǎn)品來(lái)源:
Rhinogen? IdeS protease是利用E. coli表達(dá)系統(tǒng)重組表達(dá)生產(chǎn)并經(jīng)過(guò)分子改造得到的重組IdeS蛋白酶,分子量大小約為36kDa。
產(chǎn)品質(zhì)量:
SDS-PAGE分析,純度≥95%。
產(chǎn)品特性:
最適pH為6.0~8.0。
酶活定義:
1個(gè)酶活力單位定義:37°C條件下,30分鐘內(nèi)酶切1μg重組單克隆IgG所需要的酶量。
儲(chǔ)存條件:
1. 采用冰袋或干冰運(yùn)輸, 收到產(chǎn)品后請(qǐng)立即將其置于-30℃至 -10℃凍存;
2. 使用前,用無(wú)菌水溶解IdeS protease凍干粉末。溶解后,2~8℃存放,若無(wú)菌取用,有效期為30天。
產(chǎn)品特點(diǎn):
Rhinogen? IdeS protease是一種高度純化和非常穩(wěn)定的重組蛋白酶,具有穩(wěn)定性高、比活性高等特點(diǎn)。適用于重組抗體藥物的結(jié)構(gòu)表征分析。
1. 高比活性:有效切割抗體下鉸鏈,獲得F(ab’)2和Fc片段;
2. 廣泛的底物特異性:除對(duì)人IgG1~4、猴、羊、兔IgG有酶切活力外,還對(duì)小鼠IgG2a、IgG3具有特異性切割活性;
3. 無(wú)動(dòng)物源性:重組生產(chǎn),無(wú)外源性的病毒污染,生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料;
4. 高穩(wěn)定性:每批產(chǎn)品都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品批間穩(wěn)定性。
應(yīng)用:
特定位點(diǎn)裂解IgG以產(chǎn)生F(ab’)2和Fc片段。
使用建議:
1、試劑準(zhǔn)備:
1) 使用前,請(qǐng)將Rhinogen? IdeS protease取出,10000rpm離心10秒,確保所有干粉都在管底;
2)用去離子水將Rhinogen? IdeS protease干粉溶解成50units/μl溶液。
2、推薦使用方法:
1)在消化緩沖液或其他相容緩沖液中加入所需量的IgG(0.5~10mg/ml);
2)將Rhinogen? IdeS protease加入至IgG樣品中;
注意:每1μg IgG加1 unit IdeS蛋白酶進(jìn)行消化;例如,加入1μl(50 units)IdeS溶液以消化50μg的IgG;
3)在37℃條件下孵育30~60分鐘。
操作說(shuō)明:
Rhinogen? IdeS protease能有效地切割人類,人源化,嵌合,羊,兔和猴IgG,并對(duì)小鼠IgG2a和IgG3具有較高活性。Rhinogen? IdeS protease也能切割許多Fc-融合蛋白以及抗體藥物偶聯(lián)物(antibody drug conjugates ,ADCs);
1. IdeS protease不能切割小鼠IgG1 / IgG2b,大鼠,豬,?;蛏窖?/span>IgG。此外,它不能切割非IgG同種型,包括IgA,IgM,IgD和IgE;