背景:
柔性鏈接(Flexible linker)在融合蛋白中起著重要的作用。融合蛋白是由不同蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域(functional domain)通過(guò)柔性鏈接區(qū)域連接在一起的蛋白質(zhì)。柔性鏈接區(qū)域通常包含了一段較長(zhǎng)、高度可變的氨基酸序列。柔性鏈接在融合蛋白中起到橋梁和調(diào)節(jié)作用,使不同結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)能夠協(xié)同工作,并具備更多功能多樣性和適應(yīng)性。作為融合蛋白重組不可或缺的組成部分,連接子在構(gòu)建穩(wěn)定、具有生物活性的融合蛋白中發(fā)揮著重要的作用。
在重組蛋白藥物的設(shè)計(jì)和開發(fā)中,柔性鏈接區(qū)域的選擇和優(yōu)化是一個(gè)重要的策略,可以幫助實(shí)現(xiàn)藥物的最佳效果。通過(guò)合理設(shè)計(jì)柔性鏈接區(qū)域,可以改善重組蛋白藥物的效力、穩(wěn)定性和藥理特性,為疾病治療提供更好的選擇。
包裝規(guī)格:
Rhinogen? GlyCOUPER protease包裝規(guī)格如下:
目錄號(hào)
規(guī)格
QIP-010-A
2000U
產(chǎn)品質(zhì)量:
SDS-PAGE分析,純度≥95%。
酶活定義:
在50mM Tris-HCl,150mM NaCl,pH為7.6條件下,37℃孵育15分鐘,1單位酶(1U)可消化1μg杜拉魯肽 ≥ 95%,通過(guò)SDS-PAGE確認(rèn)。
儲(chǔ)存條件:
采用冰袋運(yùn)輸,收到產(chǎn)品后請(qǐng)置于2~8℃保存,請(qǐng)勿凍存。
產(chǎn)品特性:
1. 高純度:純度 ≥ 95%;
2. 不自切:對(duì)復(fù)雜融合蛋白可進(jìn)行可靠且重復(fù)的消化,穩(wěn)定不自切;
3. 高特異性:特異性消化具有柔性連接體的融合蛋白;
4. 高穩(wěn)定性:每批產(chǎn)品都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品批間穩(wěn)定性;
5. 無(wú)動(dòng)物源性:重組生產(chǎn),無(wú)外源性的病毒污染,生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料。
產(chǎn)品應(yīng)用:
可用于消化由甘氨酸或甘氨酸和絲氨酸殘基、重復(fù)序列組成的柔性連接子。
酶切原理:
圖1. 原理圖
抗體消化:
1. 按1U GlyCOUPERprotease /1μg融合蛋白的比例進(jìn)行消化;
2. 37℃條件下反應(yīng)1小時(shí)。
使用注意事項(xiàng):
1. 根據(jù)底物的不同,可能需要優(yōu)化酶的用量和消化時(shí)間;
2. 在 pH 值為 7.6 時(shí)可達(dá)到最佳活性,在 pH值為 6.5-9 時(shí)具有活性,但不同的 GS 連接蛋白的消化效率可能不同;
3. 在消化緩沖液(50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl)中制備融合蛋白,消化反應(yīng)中蛋白質(zhì)的最終濃度應(yīng)為 1-5 mg/ml;
4. 本品僅用于科學(xué)研究,不得用于臨床診斷和治療。